"Azumanga Web Daioh" ist eine Anime-Serie, die auf dem Manga "Azumanga Daioh" von Kiyohiko Azuma basiert. Die Handlung dreht sich um eine Gruppe von Schülerinnen und ihren Alltag während der Highschool-Zeit. Die Serie beginnt mit der Ankunft von Chiyo Mihama, einem zehnjährigen Wunderkind, das aufgrund ihrer außergewöhnlichen Intelligenz die Highschool besucht. Chiyo wird schnell Teil einer Gruppe von Mitschülerinnen, die alle unterschiedliche Persönlichkeiten und Eigenheiten haben.

Zu den Hauptcharakteren gehören die ruhige und verantwortungsbewusste Sakaki, die oft von Katzen missverstanden wird, obwohl sie sie liebt; die energiegeladene und exzentrische Tomo Takino, die stets versucht, im Mittelpunkt zu stehen; die entspannte und oft schläfrige Koyomi Mizuhara, die sich mit Tomo häufig streitet; die sportliche und gutmütige Ayumu Kasuga, die wegen ihrer langsamen Art den Spitznamen "Osaka" trägt; und die zurückhaltende Kagura, die sich durch ihre sportliche Begabung auszeichnet.

Die Serie zeigt episodisch den Schulalltag der Mädchen, ihre Freundschaften, ihre kleinen Abenteuer und die humorvollen Situationen, in die sie geraten. Dabei werden Themen wie Freundschaft, Pubertät und die Herausforderungen des Erwachsenwerdens auf humorvolle und oft surrealistische Weise behandelt. Die Interaktionen zwischen den Charakteren sind geprägt von slapstickartigem Humor, absurden Dialogen und gelegentlichen emotionalen Momenten.

Ein wiederkehrendes Element ist die Beziehung zwischen den Schülerinnen und ihren Lehrern, insbesondere der Klassenlehrerin Yukari Tanizaki, die oft unprofessionell und egozentrisch handelt, und ihrer ruhigen Kollegin Minamo Kurosawa, die als Gegensatz zu Yukari dient. Die Serie endet mit dem Abschluss der Mädchen und ihrem Abschied von der Highschool, was einen emotionalen Höhepunkt darstellt, der die Bedeutung ihrer gemeinsamen Zeit unterstreicht.