Geboren 1868 als Sohn des gewalttätigen Alkoholikers Dario Brando, erlebte Dio Brando eine traumatische Kindheit, die seine rücksichtslose Weltanschauung prägte. Nach Darios Tod nutzte Dio eine Schuld, die George Joestar seinem Vater schuldete, um sich als adoptierter Bruder von Jonathan Joestar in den Joestar-Haushalt einzuschleusen. Zunächst gab er sich als vorbildlicher Gentleman aus, während er Jonathan heimlich durch psychologische Manipulation und berechnete Grausamkeit quälte, darunter das lebendige Verbrennen von Jonathans Hund Danny und das erzwungene Küssen von Jonathans Geliebter Erina Pendleton, um sie zu demütigen, was ihre lebenslange Feindschaft zementierte.

Über sieben Jahre hinweg heuchelte Dio Freundschaft, während er plante, das Joestar-Vermögen an sich zu reißen. Er vergiftete George Joestar mit demselben Gift, das seinen eigenen Vater getötet hatte, doch Jonathan deckte den Plan auf. In die Enge getrieben, versuchte Dio, Jonathan mit einer alten aztekischen Steinmaske zu töten. Als er entdeckte, dass diese Maske ihre Nutzer in Vampire verwandelt, wenn sie mit Blut in Kontakt kommt, inszenierte er ihre Aktivierung mit Georges Blut während des folgenden Kampfes und erlangte so Unsterblichkeit. Als Vampir erhielt er übermenschliche Kraft, Geschwindigkeit, Regeneration, die Fähigkeit zu fliegen, Hypnose durch Fleischknospen, Gefriertechniken und Druckaugenangriffe namens Space Ripper Stingy Eyes.

Nachdem Jonathan das Anwesen niederbrannte, floh Dio nach Windknight's Lot und schuf eine Armee von Zombies, kontrollierte Figuren wie Tarkus und Bruford und terrorisierte das Dorf. Jonathan, der in der sonnenlichtbasierten Hamon-Technik ausgebildet worden war, konfrontierte ihn mit den Verbündeten Robert E. O. Speedwagon und Will Zeppeli. Obwohl er scheinbar mehrfach besiegt wurde, überlebte Dio eine Enthauptung im finalen Kampf. Zwei Wochen später lauerte er Jonathan und Erina auf ihrem Hochzeitsdampfer auf. Nachdem er Jonathan tödlich verwundet hatte, befestigte er seinen Kopf an Jonathans Körper, kurz bevor das Schiff explodierte und im Atlantik versank.

DIO tauchte 1983 wieder auf, als er Jonathans Körper in Kairo bewohnte. Enya Geil erweckte seinen Stand, The World, der die Zeit für immer längere Dauer (bis zu 9 Sekunden) anhalten konnte. Diese Erweckung löste gleichzeitig Stand-Fähigkeiten bei Jonathans Nachkommen aus, darunter Joseph Joestar und Jotaro Kujo. Als Jotaros Mutter Holly durch ihren Stand erkrankte, reisten Jotaro und seine Verbündeten nach Ägypten, um DIO zu töten. DIO schickte Stand-Nutzer als Attentäter, darunter den willenlos gemachten Noriaki Kakyoin und Jean-Pierre Polnareff. Nachdem er Kakyoin und Joseph Joestar getötet hatte, absorbierte DIO Josephs Blut, um sich vollständig mit Jonathans Körper zu synchronisieren und seine vampirischen Kräfte sowie Stand-Fähigkeiten zu verstärken. Jotaro Kujo besiegte ihn schließlich, indem er seinen eigenen Zeit-anhaltenden Stand, Star Platinum, freisetzte und DIOs Schädel zertrümmerte. Jonathans Körper zerfiel im Sonnenlicht.

DIOs Erbe lebte durch seine biologischen Kinder weiter, die während seines Wiederaufstiegs in den 1980ern gezeugt wurden: Giorno Giovanna, Donatello Versus, Rikiel und Ungalo. Er beeinflusste den Antagonisten von Teil 6, Enrico Pucci, maßgeblich und teilte Pläne, durch Manipulation von Gravitation und universeller Wahrnehmung „den Himmel“ zu erreichen. Pucci setzte diesen Plan später mit DIOs Knochenfragment um und setzte das Universum zurück. Im alternativen Steel-Ball-Run-Universum dient Diego Brando als sekundärer Antagonist mit thematischen Ähnlichkeiten.

Physisch entwickelte sich DIO über seine Auftritte hinweg. In jungen Jahren trug er formelle Kleidung mit blondem Haar und drei Muttermalen auf seinem linken Ohrläppchen. Als Vampir in Teil 1 wurden seine Gesichtszüge schärfer mit Fangzähnen und ungepflegtem Haar, oft in kunstvollen Hemden und Schals. In Teil 3 erschien er zunächst schattenhaft auf Jonathans muskulösem Körper, später enthüllte er extravagante Outfits mit Herz-Motiven, Knieschützern und gelegentlich einer Jacke oder einem Umhang. Nach der Absorption von Josephs Blut wurde sein Haar zerzaust und seine Lippen dunkler. Sein Stand, The World, manifestierte sich als humanoide Figur mit Tauchzylindern und Herz-Designs.

DIOs Persönlichkeit drehte sich um absolute Dominanz, er lehnte die Menschheit ab, um gottgleiche Macht zu erlangen. Sein Charisma inspirierte fanatische Loyalität, doch er betrachtete andere als entbehrliche Werkzeuge. Er vertrat eine „Macht macht Recht“-Philosophie und glaubte, dass Ambition jede Grausamkeit rechtfertigte. Ik

Dio